見第3章第3節(jié)。常用的特異性單克隆抗體有:抗-CD45(白細胞)、抗-CD14(單核/巨噬細胞)、抗-CD11b(中性粒細胞)、抗-CD3(T淋巴細胞)和抗-CD19(B淋巴細胞)。...[繼續(xù)閱讀]

    原理見本章第2節(jié)“精液非精子細胞的收集”。可采用熒光染料結合的特異性單克隆抗體標記白細胞表面的分化抗原,利用流式細胞儀對其進行檢測。單克隆抗體染色過程如下。(1)試劑:①異硫氰酸熒光素(FITC)或藻紅蛋白(PE)結合的單克...[繼續(xù)閱讀]

    1.原理核酸帶有磷酸基,其等電點為pH1.5～2.0。當pH值>2.0時,核酸帶負電荷,能結合帶正電荷的堿性染料蘇木精而使胞核呈紫藍色,伊紅為酸性染料,能與細胞質中帶正電荷的蛋白質結合,使胞質呈紅色。2.試劑(1)蘇木精染液的配制:實驗室...[繼續(xù)閱讀]

    1.原理瑞氏染料是由酸性染料伊紅Y和堿性染料美藍組成的復合染料。姬姆薩染料是由天青、伊紅Y組成的染料。在一定的pH下,染料中有色離子作用于細胞,細胞根據(jù)其嗜色特性,選擇性地吸附所需染料而著色。2.試劑(1)瑞氏染液:瑞氏染...[繼續(xù)閱讀]

    1.原理同HE染色。不同的是染液中的俾士麥棕為鹽基性染料,伊紅、亮綠、橙黃等為酸性染料,能與細胞中具有相反電荷的蛋白質結合,而染成各種不同的顏色,從而能區(qū)分各種細胞成分。2.試劑(1)EA-50的配制:將伊紅Y、俾士麥棕、亮綠SF染...[繼續(xù)閱讀]

    1.原理熒光染料吖啶橙與精子核中雙鏈DNA結合后在熒光顯微鏡下發(fā)出綠色熒光,而與單鏈DNA結合時發(fā)出紅色或黃色熒光。雙鏈DNA的精子有授精能力。2.試劑吖啶橙染色液的配制:吖啶橙0.1g加蒸餾水100ml,枸櫞酸1.91g加蒸餾水至100ml,Na2HPO4...[繼續(xù)閱讀]

    1.原理死亡的精子因精子膜通透性改變可使伊紅Y染料透過精子膜,精子膜內帶陽離子的物質可與帶有陰離子的酸性伊紅Y染料相結合被染成紅色。2.試劑伊紅Y染液(見本節(jié)蘇木精-伊紅染色法)。3.操作方法取新鮮液化精液1滴,加伊紅Y溶液...[繼續(xù)閱讀]

    1.原理中性粒細胞中含有過氧化物酶,它可將雙氧水(H2O2)分解,產生新生態(tài)氧,使無色的甲苯胺被氧化成藍色的甲苯胺藍,后者進而形成棕色物使細胞著色。2.試劑①飽和NH4Cl溶液(250g/L);②5%(V/V)Na2·EDTA的pH6.0磷酸鹽緩沖液;③正甲苯胺0.025...[繼續(xù)閱讀]

    (1)采集:精液采集的最好方法是讓病人在實驗室由本人手淫采集,采精前禁欲24h以上。如果有困難也可用取精器采集。應告訴病人不能用乳膠和塑料制品的避孕套來采集精液,為保證精子的數(shù)量和質量,必須用清洗干燥的細口徑試管收集...[繼續(xù)閱讀]

    (1)固定方式:常用的固定方式有物理法和化學法兩種方法,目前對生物組織和細胞固定的方法常用化學法。其機制是利用化學試劑和細胞內蛋白質發(fā)生交聯(lián),使蛋白成分凝固穩(wěn)定,并有保存糖類和脂肪成分,使其保持活體狀態(tài)下的形態(tài)結構...[繼續(xù)閱讀]